Mutacje NHERF1 i reakcja hormonu przytarczycznego nerek ad 6

Ponadto zaobserwowaliśmy w jednej rodzinie, że mutacja była związana z niską wartością TmP / GFR i kamieniami nerkowymi. Nasze eksperymenty in vitro wskazują, że mutacje te nie miały żadnego wpływu na podstawowy wychwyt fosforanu, ale zamiast tego, zwiększyły indukowane przez PTH generowanie cAMP, a w konsekwencji hamowały transport fosforanu. Trzy linie dowodów potwierdzają koncepcję, że opisane tu mutacje NHERF1 wpływają na fenotyp komórek proksymalnych nerkowych poprzez szlak za pośrednictwem cAMP. Po pierwsze, zwiększony wydalniczy cAMP był zwiększony u pacjentów z mutacjami; po drugie, stężenie kalcytriolu w surowicy, które jest wysoce zależne od szlaku PTH-cAMP, było 13 wyższe u pacjentów z mutacjami NHERF1 niż w dopasowanych kontrolach; i po trzecie, w komórkach nerki oposa, zarówno indukowana PTH generacja cAMP, jak i wywołane przez PTH hamowanie wychwytu fosforanu były zwiększone w komórkach transfekowanych zmutowanym NHERF1 w porównaniu z komórkami transfekowanymi NHERF1 typu dzikiego. Wyniki naszych badań in vivo i in vitro są zgodne z wynikami badania Mahon i wsp., Którzy stwierdzili, że oddziaływanie NHERF-PTH1R zmniejszyło syntezę cAMP w odpowiedzi na PTH w komórkach PS1208 iw komórkach nerkowych oposa. Synteza cAMP i aktywność kinazy białkowej C w odpowiedzi na nadfiofizjologiczne stężenie PTH były podobne w hodowanych komórkach nerkowych NHERF1 – / – i komórkach NHERF1 + / +14,15 Jednakże, gdy eksperymenty przeprowadzono na plasterkach nerki NHERF1 – / -, zmniejszenie w fosfolipazie C zaobserwowano16. Nie wiadomo, czy wydalanie cAMP z moczem in vivo jest inne u myszy NHERF1 + / + i NHERF – / -.
Obserwacja, że nerkowa reabsorpcja w kanalikach nerkowych była upośledzona u pacjentów z utratą funkcji mutacji NHERF1 jest zgodna z fenotypem myszy z heterozygotycznym lub homozygotycznym zaburzeniem NHERF1. Myszy te mają hipofosfatemię z powodu zmniejszonego transportu fosforanu nerkowego i kamicy nerkowej.10,17 U tych myszy mechanizm leżący u podstaw zmniejszenia NPT2a w błonach szczotkowych granicznych ma charakter multimechaniczny. Zmniejszony wychwyt fosforanu w hodowanych proksymalnych komórkach kanalików z myszy NHERF1 – / –14 sugeruje, że NHERF1 jest wymagany do właściwego sortowania lub aktywności transporterów fosforanów. W przeciwieństwie do tego, doświadczenia ex vivo przeprowadzane w pęcherzykach pęcherzyków nerkowo-granicznych przygotowanych z myszy NHERF1 – / – wykazują normalny wychwyt fosforanowy w porównaniu z pęcherzykami ze zwierząt dzikich. Te ostatnie wyniki można wyjaśnić interakcją pomiędzy NHERF1 i sygnałem sygnałowym. ścieżka wyzwalana przez czynnik nadnerczy, taki jak PTH.
Żaden z opisywanych pacjentów nie miał hiperkalcemii, najprawdopodobniej z powodu różnych wzorów ekspresji NHERF1 i PTH1R. Rzeczywiście, w nerkach ekspresja NHERF1 jest ograniczona do kanalika proksymalnego, 18 podczas gdy PTHR1 ulega ekspresji zarówno w kanalikach proksymalnym, jak i dystalnym.19 W kości, NHERF1 i PTH1R nie są wyrażane w tych samych typach komórek: NHERF1 jest wyrażany w osteoklastach. 20, podczas gdy PTH1R ulega ekspresji w osteoblastach.21 W rezultacie pacjenci z mutacjami NHERF1 wykazywali wybiórczą anomalię równowagi fosforanowej. Fenotyp ten jest uderzająco odmienny od fenotypu napotykanego w chondrodysplazji metafizycznej Jansena (charakteryzującej się krótko-karłowatym karłowatością, ugięciem kości długich, kamicą nerkową, hiperkalcemią, łagodną hipofosfatemią, niskim stężeniem PTH w surowicy i zwiększonym cAMP w moczu), który jest powiązany w celu uzyskania mutacji PTH1R, 22 i fenotypu o zwiększonej funkcji w przypadku pseudohiperpatiajno-typu 2, w których oporność na PTH wynika z nieprawidłowości po sygnale cAMP szlaku sygnalizacji PTH.
W białku NHERF1 stwierdzono, że dwie domeny strukturalne, nazwane PDZ1 i PDZ2, oddziałują z białkami transbłonowymi Warto zauważyć, że żadna z opisanych tutaj mutacji nie wpłynęła na domenę PDZ1 w NHERF1; zamiast tego wpłynęły na PDZ2 i region pomiędzy dwiema domenami PDZ. PDZ1 został zgłoszony przez Gisler i in. odgrywają kluczową rolę w interakcji między NHERF1 i NPT2a.6 Co więcej, ostatnio wykazano, że reszta seryny w PDZ1 odgrywa kluczową rolę w tej interakcji.24 W przeciwieństwie do tego doniesiono, że PTH1R oddziałuje z PDZ1 i PDZ2 z podobnymi powinowactwami, 25 chociaż nie jest znana dokładna rola tych domen w interakcji z PTH1R. Nasze dane sugerują ważną rolę PDZ2 i domeny międzyregionalnej w interakcji z PTH1R u ludzi.
Liczba zidentyfikowanych genów zaangażowanych w homeostazę fosforanową wzrosła w ostatnich latach. Przedstawione tu badania sugerują nowy mechanizm utraty fosforanu nerkowego i hipofosfatemii, który może zwiększać ryzyko powstawania kamieni nerkowych lub demineralizacji kości.
[podobne: neurolog badania do pracy, przychodnia medycyny pracy szczecin, bada przyczyny i skutki chorób ]